pcr實(shí)驗(yàn)室建設(shè)的要求
什么是pcr實(shí)驗(yàn)室建設(shè)的基本要求？
一、pcr實(shí)驗(yàn)室建設(shè)的平面布置。
PCR擴(kuò)增檢測實(shí)驗(yàn)室原則上分為四個(gè)獨(dú)立的工作區(qū)：試劑儲(chǔ)存區(qū)及備用區(qū)，標(biāo)本制備區(qū)，擴(kuò)增反應(yīng)混合物配制及擴(kuò)增區(qū)。產(chǎn)物分析區(qū)。為了防止交叉污染，各工作區(qū)域在進(jìn)入時(shí)都是嚴(yán)格按照單一的方向進(jìn)行的，即只有試劑儲(chǔ)存區(qū)和準(zhǔn)備區(qū)→樣品制備→擴(kuò)增反應(yīng)混合物的配制和擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)。在實(shí)驗(yàn)區(qū)域間，應(yīng)采用傳送窗將試劑和樣品傳送。
二、實(shí)驗(yàn)室的空調(diào)和通風(fēng)系統(tǒng)和壓力控制設(shè)計(jì)。
pcr實(shí)驗(yàn)室建設(shè)沒有嚴(yán)格的凈化要求，但為了避免各試驗(yàn)區(qū)之間可能出現(xiàn)交叉污染，建議采用全送全排氣流組織。與此同時(shí)，應(yīng)嚴(yán)格控制送、排風(fēng)量，保證各試驗(yàn)區(qū)域的壓力要求。
1.樣品準(zhǔn)備區(qū)域。
在這一地區(qū)主要進(jìn)行的操作是保存樣品.核酸(RNA.DNA)提取，儲(chǔ)存，儲(chǔ)存，添加到擴(kuò)增反應(yīng)管，檢測DNA合成。該地區(qū)的壓力梯度要求是：對相鄰區(qū)域進(jìn)行正壓，以避免相鄰區(qū)域內(nèi)空氣中污染物的進(jìn)入。此外，由于氣溶膠對環(huán)境的污染，在加樣過程中應(yīng)盡量避免對環(huán)境造成不必要的污染。
2.試劑儲(chǔ)藏和準(zhǔn)備區(qū)域。
在實(shí)驗(yàn)區(qū)域內(nèi)，主要進(jìn)行了試劑的配制、試劑的分裝、主反應(yīng)混合物的制備。試樣所用的試劑和物料必須直接運(yùn)到區(qū)內(nèi)，不能通過其它區(qū)域。在本區(qū)儲(chǔ)存試劑原料，并在本區(qū)內(nèi)配制成所需儲(chǔ)存試劑。對于風(fēng)壓的控制，本地區(qū)并無嚴(yán)格的要求。
3.產(chǎn)物分析的擴(kuò)展領(lǐng)域。
在這一地區(qū)，主要是對擴(kuò)增片段的測定。該地區(qū)是主要的擴(kuò)增產(chǎn)物污染源，因此該地區(qū)要求壓力梯度為負(fù)，以避免該地區(qū)擴(kuò)增產(chǎn)物從該地區(qū)擴(kuò)散到其他地區(qū)。
4.反應(yīng)混合物的調(diào)配和擴(kuò)展區(qū)域。
在這一地區(qū)主要進(jìn)行的是DNA擴(kuò)增。另外，該區(qū)還可以將制備的DNA模板(樣品處理區(qū))和主反應(yīng)混合液(試劑貯藏和準(zhǔn)備區(qū))制備為反應(yīng)混合液，等等。本地區(qū)的壓力梯度要求是：在本區(qū)域內(nèi)，采用負(fù)壓方式，避免本地區(qū)氣溶膠泄漏。應(yīng)盡量減少因氣霧劑造成的污染而不必要的出行。
